Вважається, що перша святиня на місці храму Успіння Пресвятої Богородиці Православної церкви України існувала ще в княжі часи.
Після численних пожеж та руйнувань храм було відбудовано у стилі ренесанс вкінці XVI – на початку XVII століття архітекторами Петром Італійцем та Павлом Римлянином. Саме в цей час зведено нову дзвіницю – вежу Корнякта та каплицю Трьох Святителів
Завдяки діяльності львівського братства у 1586 році було засновану першу братську школу в Україні, де здобув освіту митрополит Петро Могила. Школа згодом вийшла на рівень закладу вищої освіти.
1788 року на базі братства виникає Ставропігійний Інститут. При Інституті існували музей, архів, друкарня та братська школа. На початку ХХ ст. було створено унікальні вітражі авторства Петра Холодно у пронаціональному дусі.
Сьогодні це храм Успіння Пресвятої Богородиці Православної церкви України.
